Promover la actividad de detección de laccasa para la detección de catecoles utilizando conjuntos LBL de quitosano/líquido iónico/ftalocianina como superficies de inmovilización

El rendimiento de los biosensores electroquímicos basados en la laca puede mejorarse inmovilizando la enzima en soportes compuestos capa por capa (LbL) en los que se combinan materiales con funciones complementarias. Las películas de LbL están formadas por capas que combinan un material electrocatalítico que favorece la transferencia de electrones (ftalocianina de cobre sulfonado, CuPcS(-)), un líquido iónico que mejora la conductividad eléctrica de las capas (tetrafluoroborato de 1-butil-3-metilimidazolio, IL(+)) y un material capaz de promover la inmovilización de la enzima (quitosano, CHI(+)). Se ha demostrado que las películas compuestas con diferentes estructuras son electrocatalizadores eficaces, que producen un aumento de la magnitud de las respuestas hacia el catecol. El efecto electrocatalítico más intenso y reproducible se observó cuando se colocó una capa de CuPcS(-) encima de una capa formada por una mezcla de CHI(+) + IL(+) para obtener películas [CHI(+) + IL(+)|CuPcS(-)]2 .

Los biosensores con lacasa inmovilizada en la superficie de las capas de LbL [CHI(+) + IL(+)|CuPcS(-)]2|Lac mostraron una transferencia de electrones mediada entre la enzima redox y la película y una reproducibilidad del rendimiento de dispositivo a dispositivo de 4,1%. El biosensor amperométrico mostró una sensibilidad de 0,237 A-M-1 y un rango de detección lineal de 2,4 μM a 26 μM para el catecol. El excelente Límite de detección (LOD) de 8,96-10-10 M (3-σ /m) es un orden de magnitud inferior al obtenido en estudios similares. Una constante de Michaelis-Menten de 3,16 μM confirma una excelente afinidad enzimática-sustrato.

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